SuperStar TaqMan Mixture（With ROX）

專用于探針法（TaqMan， Molecular Beacon 等）實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的預(yù)混體系，濃度為 2×，包含 SuperStar Taq DNA Poly-merase、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+和 ROX染料， 操作簡單方便。主要用于基因組 DNA 靶序列和 RNA反轉(zhuǎn)錄后 cDNA靶序列 檢測，如基因表達(dá)分析，拷貝數(shù)分析，SNP 基因型分析等，適用于不同類型 探針法熒光定量。本品含有的SuperStar Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)化學(xué)修 飾的、全新高效熱啟動酶，在常溫下沒有聚合酶活性，有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結(jié)合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴(kuò)增，酶的激 活須在 95℃下孵育 10 分鐘。該 PCR 緩沖體系與熱啟動酶的組合，顯著 提高了 PCR 的擴(kuò)增效率，熒光信號更強(qiáng)，靈敏度更高，可以檢測單拷貝的模 板。使用本產(chǎn)品可以得到更廣的線性范圍，對目的基因定量更準(zhǔn)確。所含的 ROX 染料可校正定量 PCR 儀孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差，適用于以 ROX 作為校正染料的所有熒光定量 PCR 儀。

注意事項(xiàng)1. 使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。2. 本產(chǎn)品中含有 ROX 染料，保存本產(chǎn)品或配制 PCR 反應(yīng)液時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射。3. 避免反復(fù)凍融本品，反復(fù)凍融可能使產(chǎn)品性能下降。本產(chǎn)品長期保存可置于-20℃，避光。如果在短期內(nèi)需要頻繁使用，可在 2-8℃保存。使用方法以下舉例為常規(guī) PCR 反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的改進(jìn)和優(yōu)化。1. PCR 反應(yīng)體系(以 50ul 反應(yīng)體系為例)

注意：1）通常引物濃度以 0.2uM 可以得到較好結(jié)果，可以在 0.1-1.0uM 作為設(shè)定范圍的參考。2）使用的探針濃度，與使用的熒光定量 PCR 儀、探針種類、熒光標(biāo)記物質(zhì)種類有關(guān)，實(shí)際使用時(shí)請參照儀器說明書，或各熒光探針的具體使用要求進(jìn)行濃度的調(diào)節(jié)。3）通常 DNA 模板的量以 10-100ng 基因組 DNA 或 1-10ng cDNA 為參照，因不同物種的模板中含有的目的基因拷貝數(shù)不同，可對模板進(jìn)行梯度稀釋，以確定最佳的模板使用量。2. PCR反應(yīng)程序注意！本產(chǎn)品預(yù)變性反應(yīng)必須在 95℃ 10 分鐘下完成！兩步法 PCR：

注意：1）本產(chǎn)品所采用的熱啟動酶須在預(yù)變性 95℃、10 min 條件下實(shí)現(xiàn)酶的活化。2）建議采用兩步法 PCR 反應(yīng)程序，若因使用 Tm 值較低的引物等原因，得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，可嘗試進(jìn)行三步法 PCR 擴(kuò)增，退火溫度請以56℃-64℃的范圍作為設(shè)定參考。

特點(diǎn):高效 熱啟動適用范圍:熒光定量 PCR保存條件：-20℃避光保存

本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途

上海牧榮生物科技有限公司

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