基質(zhì)效應(yīng)產(chǎn)生的來源，來自樣本內(nèi)部各類內(nèi)源組分，血清、血漿樣本含有內(nèi)源抗體、各類蛋白、脂質(zhì)、細胞因子，這些組分有可能和試劑盒當(dāng)中固相抗原或者抗體發(fā)生非特異性結(jié)合，改變顯色信號，造成檢測值高于或者低于真實濃度。不同個體來源的生物樣本，基質(zhì)組分存在差異，部分樣本會出現(xiàn)明顯基質(zhì)干擾，而同批次其他樣本干擾微弱，這種個體差異，沒有辦法單純依靠說明書規(guī)避。開展正式實驗之前，可以收集多份來自健康個體的空白基質(zhì)樣本，把已知濃度的待測物加入空白基質(zhì)，對比緩沖液體系當(dāng)中的回收水平，以此評估基質(zhì)帶來的影響程度。

　　基質(zhì)干擾如果不加以處理，定量結(jié)果會失去參考價值，行業(yè)內(nèi)常用3種方式緩解基質(zhì)效應(yīng)，分別是樣本稀釋、基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線、樣本前處理。樣本稀釋操作簡單，但過高倍數(shù)稀釋，會讓待測物濃度落在試劑盒檢測下限附近，放大檢測誤差，稀釋倍數(shù)需要兼顧干擾抑制與檢測區(qū)間?；|(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線，是把校準(zhǔn)品加入空白基質(zhì)當(dāng)中，而不是單純使用緩沖液配制，讓校準(zhǔn)體系和待測樣本處在一致基質(zhì)環(huán)境，以此抵消部分基質(zhì)帶來的偏移。部分樣本脂質(zhì)含量偏高，簡單稀釋無法消除干擾，就需要搭配前處理步驟，但前處理流程會造成待測物損失，需要同步評估前處理之后的回收率。

　　除基質(zhì)效應(yīng)之外，還要關(guān)注檢測的選擇性，也就是樣本當(dāng)中結(jié)構(gòu)類似物質(zhì)會不會干擾目標(biāo)物測定。生物藥研究過程，部分樣本內(nèi)存在結(jié)構(gòu)相近的分子，這類分子有機會和試劑盒當(dāng)中的識別組分發(fā)生結(jié)合，給出假陽性讀數(shù)?？梢耘渲撇煌瑵舛鹊慕Y(jié)構(gòu)類似物，加入空白基質(zhì)，觀察試劑盒是否會產(chǎn)生信號，確認(rèn)在實驗濃度范圍之內(nèi)，類似物質(zhì)不會帶來明顯干擾。很多項目容易忽略選擇性評估，當(dāng)待測樣本存在復(fù)雜背景，就容易出現(xiàn)難以解釋的陽性結(jié)果，消耗大量時間排查原因。

　　定量區(qū)間的確認(rèn)同樣屬于方法學(xué)驗證的組成部分，試劑盒標(biāo)注的區(qū)間，大多基于特定基質(zhì)條件得到，當(dāng)待測基質(zhì)不一樣，高低濃度端的表現(xiàn)會發(fā)生變化?？梢栽O(shè)置高、中、低3個濃度的質(zhì)控樣本，分散在整個定量范圍，穿插在每一塊酶標(biāo)板當(dāng)中，監(jiān)控整塊板檢測波動。每一輪實驗，都要同步運行質(zhì)控樣本，借助質(zhì)控樣本的檢測結(jié)果，判斷整塊板的數(shù)據(jù)是否可以接納，不達標(biāo)就需要重新開展整板檢測。部分課題組只做待測樣本，缺少隨板質(zhì)控，一旦整板出現(xiàn)漂移，全部樣本數(shù)據(jù)都失去價值。

　　免疫學(xué)定量檢測，試劑盒只是工具，基質(zhì)效應(yīng)、選擇性、隨板質(zhì)控共同構(gòu)建方法學(xué)基礎(chǔ)。加拿大AffinityImmuno試劑盒為生物制藥免疫學(xué)檢測提供方案，而貼合項目樣本特征的驗證工作，是獲得合規(guī)可用數(shù)據(jù)的重要保障。